科研血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很複雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yang) 條件不同而異。景源實驗技術介紹一下在科研血清實驗中常見的一些問題。

1、如何貯存和凍結血清才不會(hui) 使產(chan) 品質量受損?

將血清從(cong) 冷凍箱取出後，先置於(yu) 2～8℃冰箱使之融解，然後在室溫下使之全融。但有必要注意的是，融解過程中有必要規矩地搖晃均勻。長時刻貯存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而構成沉積或可見的混濁。因而，推薦在-20℃以下貯存血清，並防止反複凍融。主張血清應保存在-2O℃。若存放於(yu) 4℃時，請勿超過一個(ge) 月。若一次無法用完一瓶，主張無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內(nei) ，再放回冷凍。

2、血清中包含絮狀沉積，它們(men) 是什麽(me) ，怎樣處理?

這些沉積包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(hui) 影響產(chan) 品性質。要除掉沉積，離心血清(400g，1-2分鍾)或許簡單的讓其沉積在瓶子底部，將血清小心地轉移到另一個(ge) 無菌瓶裏(一般不主張選用過濾的辦法除掉沉積，由於(yu) 沉積會(hui) 堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉積並加熱至37℃就會(hui) 再溶解。所以，運用產(chan) 品時要搖動並加熱血清至37℃，沉積會(hui) 天然消失。

3、如何防止血清中發作沉積?

按如下操作可防止沉積的發作：

(1)凍結血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，削減沉積的發作。

(2)血清分裝凍存時，須規矩搖晃均勻(當心勿形成氣泡)，使溫度與(yu) 成分均一。

(3)勿直接由-20℃直接至37℃凍結，因溫度改變太大，簡單形成蛋白質凝結而發作沉積。

(4)勿將血清置於(yu) 37℃太久，否則血清會(hui) 變得汙濁，一起血清中許多較不穩定的成份也會(hui) 因而受到破壞，從(cong) 而影響血清的品質。

(5)若有必要做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鍾的原則，並且隨時搖晃均勻。溫度過高，時刻過久或搖晃不均勻，都會(hui) 形成沉積物的增多。

在ELISA實驗的過程中，血清培養(yang) 是很重要的步驟，但是在這過程中也會(hui) 出現一些的問題，比如說，在培養(yang) 進程中會(hui) 出現一個(ge) 個(ge) “小黑點"的現象，這是怎樣一回事呢？接下來就為(wei) 大家解析一下這個(ge) 現象出現的原因以及解決(jue) 方法。

我們(men) 一旦發現培養(yang) 基中有黑點，我們(men) 先不要著急，也不要慌張，要搞清楚這個(ge) 黑點是什麽(me) ?什麽(me) 構成的?首先，要肉眼觀察培養(yang) 基是否混濁，然後，在鏡下觀察培養(yang) 細胞生長的狀況，黑點是否遊動等。如果細胞被汙染，微生物則會(hui) 不斷繁衍，培養(yang) 基就會(hui) 敏捷變黃、變混濁。汙染包括細菌汙染、支原體(ti) 汙染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀況出色，與(yu) 黑點出現前比較，沒有任何改變，那麽(me) ，黑點的出現或許與(yu) 以下幾種狀況有關(guan) ：

第一，細胞生長過老，黑點是破碎的細胞殘骸

第二，血清質量欠好，重複凍融的效果

第三，製作培養(yang) 基的pH值偏高，不宜細胞生長

第四，製作培養(yang) 基的水質、容器不合格(可應用離心、過濾的方法去除這些黑點)

第五，培養(yang) 的原代細胞中出現小黑點(或許是原代組織中的ufc雷竞技，屢次傳(chuan) 代能夠消除)。

那麽(me) 我們(men) 怎樣防止黑點生成呢？一般要做到以下幾點：

(1)盡可能減少血清凍融次數。

(2)培養(yang) 基無需37℃水浴。

(3)培養(yang) 基保持PH值7.0- 7.2。

(4)嚴(yan) 格控製製作培養(yang) 基的水質，容器定時衝(chong) 刷。

(5)掌握細胞傳(chuan) 代的機會(hui) ，細胞切勿生長過老。