預期用途

CRM-GYM-b是一種經過認證的校準溶液，專(zhuan) 為(wei) GYM的分析方法開發和準確定量而設計。CRM-GYM-b的濃度使其適用於(yu) 製備用於(yu) 校準液相色譜（LC）和液相色譜-質譜（LC-MS）儀(yi) 器的稀釋係列，以及用於(yu) 回收實驗的貝類對照樣品的加標。

CRM-GYM-b的製備

GYM是在Cawthron研究所（Nelson，New Zealand）從(cong) 賣方卡氏菌的實驗室培養(yang) 物中分離出來的。通過一係列色譜步驟對其進行純化。CRM溶液是通過將純GYM溶解在脫氣的高純度甲醇（含有0.05%三氟yi酸）中來製備的。將該溶液用Teflon攪拌棒和磁力攪拌器充分混合，同時在氬氣氛下的冰浴中冷卻。將等分試樣分配到琥珀色玻璃安瓿中，並在氬氣下進行火焰密封。然後對安瓿進行標記、包裝，並立即轉移到-80°C下長期儲(chu) 存。

結構確認和純度評估

通過1H核磁共振（NMR）證實了用於(yu) 製備CRM-GYM-b的GYM的結構和純度（圖1）。LC-MS/MS產(chan) 物離子光譜顯示了GYM的碎裂現象（圖2）。

使用LC-MS對GYM儲(chu) 備溶液進行純度評估。雖然沒有觀察到主要ufc雷竞技，但檢測到許多GYM相關(guan) ufc雷竞技（M/z 524.4處的[M+H]+）的含量非常低（<0.1%）（圖3）。從(cong) GYM中分離出一種早期洗脫的未知GYM異構體(ti) ，占GYM總濃度的<1%，並使用不同的等度條件通過LC-MS進行檢測（圖4）。

同質性

在填充係列中選擇代表性數量的安瓿（n=24），以確定CRM-GYM-b的均勻性。通過LC-MS進行分析。瓶間的變化被測量為(wei) 小於(yu) 一種溶液的重複分析的變化（n=24，RSD<3%），因此在整個(ge) 安瓿範圍內(nei) 證明了可接受的均勻性。

穩定性研究

CRM-GYM-b在甲醇（0.05%TFA）中的短期穩定性使用反向等時穩定性研究設計[9]進行評估，參考溫度為(wei) -80°C。在30天的時間裏，在高達+37°C的溫度下沒有觀察到GYM的降解，這表明在短期內(nei) 具有良好的穩定性。在6個(ge) 月後的一項長期研究中，+37°C下的降解確實變得顯著。使用-12°C斜率的標準誤差，確定了與(yu) 長期穩定性評估相關(guan) 的不確定度，以納入CRM-GYM-b的最終組合不確定度。長期穩定性的相對不確定度（µlts）為(wei) 1.14%。CRM-GYM-b的建議儲(chu) 存溫度為(wei) -12°C或更低。

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