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細胞培養實驗的血清如何挑選
  • 更新日期:2024-08-05      瀏覽次數:290
    • 一、什麽(me) 是血清

      血清,指血液凝固後,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子後分離出的淡黃色透明液體(ti) 或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其中牛血清是重要的細胞培養(yang) 添加成分,具有終止胰蛋白酶消化,提供細胞生長所需的貼壁因子、免疫球蛋白、胰島素等其他營養(yang) 物質的作用。

      二、血清的分類與(yu) 區別

      根據采血時間的不同,牛血清通常分為(wei) 胎牛血清(FBS)、新生牛血清(NCS)、小牛血清(BCS)、供體(ti) 血清。

       細胞培養(yang) 實驗的血清如何挑選

      這四種有什麽(me) 區別?

      (1)采血方式不同:胎牛血清是母牛懷孕3-8個(ge) 月時,采用剖腹心髒密閉穿刺取血;而新生牛血清、小牛血清和供體(ti) 牛血清分別是取自新生牛(小牛)、成牛的血。

      (2)血清成分不同:胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體(ti) 、補體(ti) 等對細胞有害的成分最少;促細胞生長因子、促附因子、激素及其他活性物質等組分也不同於(yu) 其他幾類血清。

      (3)用途不同:某些細胞的培養(yang) 必須使用胎牛血清才行。如:幹細胞、淋巴細胞、神經細胞等;而有些細胞需要小牛血清就可以,如腫瘤細胞等。使用濃度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的濃度在20%。

      (4)顏色不同:血清根據血紅蛋白含量的不同,表現的顏色也不一樣。真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂,一般表現出微紅色或橘色;而新生牛(小牛)血清則表現為(wei) 蠟黃色或偏黃色。

      (5)澄清度和粘稠度不同。胎牛血清中的蛋白和脂類含量低,表現為(wei) 稀薄、清淡,而新生牛(小牛)血清相比更加粘稠。

      理論上,優(you) 質的胎牛血清在細胞培養(yang) 方麵通常優(you) 於(yu) 其他類型的血清,與(yu) 新生牛和小牛血清相比,各類生長因子含量更為(wei) 豐(feng) 富。

      但是由於(yu) 胎牛血清價(jia) 格相對較高,且不同實驗對於(yu) 血清的需求也不同,因此要綜合考慮各實驗室、生產(chan) 企業(ye) 的條件與(yu) 所培養(yang) 細胞類型等多方麵因素。

      另外,除了以往根據經驗和文獻報道,必要時也可進行針對特定細胞的血清篩選試驗,以篩選出最佳血清。

      三、血清如何正確保存?

      血清在生產(chan) 製備完成後,通過質量檢測,然後被運送至市場上銷售。整個(ge) 過程中,包括運輸流程,儲(chu) 存溫度應嚴(yan) 格保證在-20℃,避免反複凍融影響血清活性。

      另外,實驗人員在收到血清後一定要進行檢查,確認完好後及時送至-20℃冰箱中儲(chu) 存,用時再取出解凍。如果一次無法用完一瓶,應該無菌分裝後冷凍保存。注意避免反複凍融。

      四、血清如何正確解凍使用?

      首先將血清置於(yu) 冰箱2-8℃中12-24小時,使之緩慢部分溶解,再放到室溫下全溶。

      注意:溶解過程中要每隔一段時間緩慢地搖動血清使之混勻。切記:避免37℃水浴。

      另外,解凍後的血清,不宜在4℃冰箱中放置過久。